微电极拉制仪耗材总用不对?来看这

微电极拉制仪耗材总用不对?来看这

作者:瑞沃德
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是否有时候,你也对微电极拉制仪耗材的选用拿不准:


不同实验,玻璃管选厚壁还是薄壁?


如何判断何时更换加热片?


到了什么程度要更换干燥剂?……


耗材没选对,往往直接影响实验结果!别急,本期干货从玻璃管、加热片、干燥剂三大部分,带你轻松get微电极拉制仪耗材选用!


微电极拉制仪

 

一、玻璃管篇


1、玻璃管材质类型有哪些,如何选择?

主要有3类,硼硅酸盐玻璃(Borosilicate, B)、铝硅酸盐玻璃(Aluminosilicate, A)和石英(Quartz, Q),均属于硬质玻璃。普遍使用的是硼硅酸盐玻璃,熔点最低(约800℃),应用广泛,包括膜片钳电极、细胞注射电极等等;石英熔点最高(约1700℃),电极尖端最硬,比较昂贵,较少使用。


2、玻璃管包装信息代表什么含义?

以瑞沃德的毛细玻璃管为例,型号B-15086-10F,B代表硼硅酸盐玻璃材质,150代表外径(outer diameter, OD)为1.5mm,86代表内径(inner diameter, ID)为0.86mm,10代表玻璃管长度为10cm,F代表带芯玻璃管(Filament)。重点关注内外径参数,其对电极尖端大小影响不同。


3、玻璃管的薄壁和厚壁如何区分,不同实验场景如何选择呢?

一般是将内径/外径的比例<0.6称为厚壁玻璃管,≥0.7称为薄壁玻璃管,通常内外径之比在0.5-0.75,但其实两者无严格界限。厚壁拉制出的电极颈部较长,尖端较小,电容噪声较低,适合作为膜片钳记录电极等;薄壁拉制出的电极尖端较大,电阻较低,适合各种注射电极。


4、玻璃管带芯的作用是什么?

带芯的目的是为了便于灌注电极内液,尽快排出电极内的气泡。这个“芯”指的是玻璃管内部侧壁上与玻璃管煅烧在一起的玻璃细管,在灌注电极内液时可以引导液体迅速到达尖端。如细胞内记录电极,尖端直径小于1μm时,灌注内液变得很困难,需要使用带芯的电极。


二、加热片篇


1、加热片的类型有哪些,如何选择?

主要包括槽形加热片与盒形加热片,后者使用更为普遍。盒形加热玻璃管比较均匀,无中轴偏离情况,拉制时间较短,特别适合拉制膜片钳电极、显微注射电极等。


2、加热片的不同长度和宽度对拉制效果有什么影响?

加热片越宽,拉制出的电极颈部越长;加热片越窄,电极的颈部越短,尖端较小。


3、如何判断何时更换加热片?

加热片对于拉制电极的稳定性至关重要,当有以下情况时需进行加热片的更换:

a. 加热片表面坑坑洼洼,颜色灰暗,类似很旧的铝箔;

b. 加热片形状扭曲,凹陷明显,被玻璃管触碰过(如下图左图);

c. 加热片的使用时间过长,或使用非常频繁,呈现变薄的状态。


 

4、加热片被烧坏的原因可能有哪些?

可能原因有:a. 初次使用/更换玻璃管/更换加热片后,没有进行软化点测试直接调用程序拉制电极,此时的热量可能远大于软化点,从而导致烧坏加热片;b. 热量值过大。在调试过程中,通过不断增加热量以获得高电阻或小口径的电极,当热量增加到一定程度时,会烧毁加热片。因此,初次使用/更换玻璃管/更换加热片后首先要进行软化点测试,增加热量时一般不超过软化点的15%。


三、干燥剂篇


1、干燥剂的组成及作用方式是什么?

干燥剂主要由无水硫酸钙组成,用于吸收空气冷却系统中的水蒸气。干燥剂对于拉制电极稳定性较为重要,当空气冷却系统湿度增大时,拉制出的电极尖端口径大小波动较大。因此需要多加注意干燥剂的颜色变化。


2、如何判断何时更换干燥剂?

干燥剂干燥状态下为蓝色或者蓝紫色,吸潮后变成粉红色。当干燥剂大部分为粉红色时(一般2/3时),需要更换干燥剂,保证拉制效果稳定。通过阅读以上内容,相信很多小伙伴都有种豁然开朗的感觉~更加了解拉制仪配套耗材的选择及使用,可以大大提升我们的实验效率。


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