详解冰冻切片机防卷板的安装及调试方法

工具：随机器附带的1.5 mm、2.5 mm、3 mm内六角扳手。

1、防卷板的安装

> 步骤1：取出玻璃防卷板，拆松防卷板组件上的黑色手拧螺母，将玻璃防卷板装入防卷板支架，再将黑色的手拧螺母拧紧；

> 步骤2：将防卷板组件上销钉孔与刀架左侧销钉组合，并将刀架上的螺钉孔与防卷板组件上的通孔使用螺丝连接，使用随机器附带的2.5 mm内六角扳手将螺丝打紧。

2、防卷板组件的安装调试

图1

> 步骤1：首先检查玻璃上边缘是否与刀片平齐，如不平齐，调整锁紧件（7）使玻璃上边缘下降至刀片平齐位置，平齐后两者不平行需进行步骤2进一步调节；

> 步骤2：使用3 mm内六角扳手拧松上图所示的螺钉(4)，使摆转臂(6)可以活动；

> 步骤3：通过1.5 mm内六角扳手调节顶丝(5)使摆转臂(6)处于正确位置，即保证刀口与玻璃上边缘平行(如上图放大区域所示)。最后使用3 mm内六角扳手打紧螺钉(4)；

> 步骤4：调节锁紧件（7），使得样本可以顺利通过玻璃防卷板与刀片间的空隙，至此调试完毕。

一、防卷板组件调试常见问题

1、可以见到完整的切片，但切片走向玻璃防卷板上方，不进入玻璃防卷板

问题原因：玻璃防卷板太低，需要通过调整锁紧件（7），增加玻璃防卷板高度。

2、样品与防卷板撞击，切片褶皱在玻璃上

问题原因：玻璃防卷板太高，需要通过调整锁紧件（7），降低玻璃防卷板高度。

二、使用防卷板切片的操作步骤

（以瑞沃德冷冻切片机为例）

1、设置好样本头温度，将冻好的样本安装到样本上。

2、向前拨动摇杆将样本移近刀口，可根据样本与刀口的角度差异适当调整样本头角度。

3、使用多功能摇杆左右拨动调整切片模式为修片模式（厚度推荐20-40 μm）,使用手轮通过半刀、全刀或通过慢速进样旋钮+半刀旋转手轮完成粗修。（如熟练掌握摇杆进样节奏，也可在切片模式下轻微拨动摇杆完成修片操作）。

4、粗修完成后可左右拨动多功能摇杆调整切片模式为切片模式，使用手轮通过半刀、全刀完成细修。

5、修好后扫除废屑后即可放下防卷板，如有需要可调整防卷板位置（可参见一、防卷板组件调试常见问题），使切出的样本平整的进入防卷板与刀片的狭缝。

6、打开防卷板，完成贴片（如样本发生轻微卷曲，可使用毛笔轻轻将卷曲部分轻轻摊平）。

三、使用常见问题

1、切片沾在防卷板上

问题原因：

1）防卷板组件冷冻不足，需要等待防卷板组件达到冷冻箱温度；

2）防卷板上沾染了静电，防卷板本身带有一定防静电能力，可稍等几分钟或使用导电材料将静电导向箱壁；

3）防卷板脏污，擦去脏污；

4）防卷板未正确固定。

2、切片无法正常进入玻璃防卷板与刀片间的缝隙

问题原因：玻璃防卷板高度不恰当，需要调整玻璃防卷板高度，调试方法见调试常见问题。

3、防卷板组件内切片打卷

问题原因：

1）样本太大，防卷板组件一般支持0.5 cm-1 cm左右组织，组织太大容易打卷；

2）样本头设置温度偏低，可将样本头温度适当上调；

3）OCT太多或样本边缘存在空洞，OCT包埋以刚好包住样本为宜，样本边缘存在空洞时可以适当补全或重包；

4）防卷板玻璃、刀片或刀架存在脏污或防卷板玻璃、刀片存在损坏，擦拭防卷板玻璃、刀片，更换防卷板玻璃的面，更换刀片。

4、样本上存在明显的挂痕

问题原因：防卷板玻璃、刀片存在损坏，更换防卷板玻璃的面，更换刀片。

5、防卷板掀起时样本原本平整的切片迅速卷曲

问题原因：防卷板温度偏高。

四、防卷板组件推荐使用范围

1、50 μm防卷板适宜切片厚度＜4 μm时防卷，100 μm防卷板适宜切片厚度5-50 μm时防卷；

2、防卷板一般可以支持0.5-1 cm的组织防卷，如果有更大的样本切片，建议使用毛笔辅助防卷。