肾穿组织的最佳制片方法如何操作？

作者：RWD

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病理切片方案科研切片方案

就肾脏制片的质量而言，病理工作者比较公认的标准为:

1、2μm切片厚度，切片无折叠及刀痕，切片完整，薄如蝉翼。

2、染色清晰，透明性好，对比鲜明。免疫组化或免疫荧光定位准确。

那么，如何操作才能制出高质量的肾穿组织制片？今天，为大家带来肾穿组织的最佳制片方法，我们一起来看看吧！

肾穿组织的最佳制片方法如何操作？

具体方法及步骤

1、取材：穿刺抽取肾组织，颜色偏暗红，相对密度较大。放大镜下可见到暗红色的髓质和颜色稍淡的肾皮质（皮质中可见到呈模糊的小红点结构的肾小球），放入固定液中，可沉于瓶底。

2、固定：PB-FA固定液①，既有FAA固定液的优点，也可以避免组织中红细胞的溶解。

3、脱水

(1)常温80%乙醇(60min)

(2)95%乙醇Ⅰ(60min)

(3)95%乙醇Ⅱ(30min)

(4)无水乙醇Ⅰ(20min)

(5)无水乙醇Ⅱ(20min)

(6)无水乙醇Ⅲ(20min)

4、透明

(1)正丁醇Ⅰ(30min)

(2)正丁醇Ⅱ(30min)

(3)正丁醇Ⅲ(30min)

5、浸蜡

(1)石蜡Ⅰ(45~50℃：40min)

(2)石蜡Ⅱ(56~58℃：50分钟)

(3)石蜡Ⅲ(56~58℃：60分钟)

6、包埋：韧性较强的石蜡。

7、切片：2~3μm

8、染色：普通HE染色、免疫组化染色、免疫荧光染色等。

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