脆性组织切片的制作技术是什么?
脆性组织切片的制作技术是什么?
我们都知道,使用石蜡切片机在常规石蜡组织切片时,在浸蜡环节时间稍长、温度过高或者透明时间过长等,可能会使蜡块组织变硬、发脆,导致切片时厚薄不均,连片性差甚至不能连片。本期瑞沃德给大家梳理了一些优化改进方法,希望能对大家有所帮助。
石蜡组织切片方法一
1.标本处理
组织取材及时放入10%中性甲醛内,加强固定效果,取材后,将装有固定液的密封容器置56℃温箱充分固定(建议8~10min)。
2.脱水
(1) 70%乙醇:0.5h
(2) 80%乙醇:1h
(3) 90%乙醇Ⅰ:1h
(4) 90%乙醇Ⅱ:4h
(5) 无水乙醇Ⅰ:1h
(6) 无水乙醇Ⅱ:1h
3.透明
(1) 正丁醇Ⅰ:1h
(2) 正丁醇Ⅱ:2h
(3) 正丁醇Ⅲ:3h
4.浸蜡
医用石蜡熔点为56~58℃,自动脱水机的温度控制在60℃范围内。
(1) 石蜡Ⅰ0.5h
(2) 石蜡Ⅱ1h
(3) 石蜡Ⅲ2.5h
5.摊片
切片先放入蒸馏水加少许乙醇(增强张力)的摊片水中,用眼科镊(无损伤)辅助展平片子,用玻片捞出将片子放进42℃温水中展片。
石蜡组织切片方法二
1.标本处理
各种组织立即固定于 ASAF 液①中1~2小时。
2.脱水
(1) 95%乙醇Ⅰ、Ⅱ脱水各1h
(2) 混合脱水剂②Ⅰ、Ⅱ各1h
3.透明二甲苯10~20min
4.其余步骤
与常规制片相同。
5.优点
步骤少,节省时间;容易切片,组织收缩较小,染色后纤维和细胞核清晰。
大家后期也可以挑选些结构疏松、质软脆嫩的组织如:血块、甲状腺、黏液样组织、子宫内膜、淋巴结、脑组织等,切3~4μm。看看切片质量及染色效果。
释义①:ASAF固定液:水杨酸10g溶于85ml95%乙醇中,再加入纯乙酸5ml、40%甲醛10ml,混匀即可。
释义②:无水乙醇及100%正丁醇等量混合。
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