冷冻切片有哪些常见问题？对应的原因及解决方法是什么？
冷冻切片有哪些常见问题？对应的原因及解决方法是什么？
在冷冻切片的过程中，你是否也遇到：
- 切片有划痕
- 切片厚度不均
组织黏在防卷板上……
想要制作一张高质量的组织切片，不仅需要长期的反复练习，更需要借鉴前人的经验。本期我们将从大家实际冷冻切片中遇见的问题着手，查找原因并给出对应的解决办法。
问题01：箱体结霜
- 原因：
1、切片机窗户打开时间过长；
2、机器自身温控性能差。
- 解决方案：
1、不使用机器时注意关好玻璃窗；
2、做除霜处理；
3、瑞沃德冷冻切片机制冷和温控性能可以有效避免结霜问题，同时可设置自动除霜和手动除霜。
问题02：切片发黏
- 原因：
组织、刀片、防卷板都可能温度过高，导致片子回温湿润。
- 解决方案：
1、当机器到达设定温度后，再制冷一段时间再切片，保证箱体内部硬件冻透；
2、适当延长样本冷冻时间或者把样本放在速冻台快速冷冻位点制冷。
问题03：切片开裂，不能正常展开
- 原因：
1、组织过冻，脆性增加；
2、刀片或防卷板上有碎屑或者有细微缺口；
3、组织包埋不规则，有细微隆起。
- 解决方案：
1、调高样本头温度，适当缩短组织冷冻时间；
2、清理防卷板和刀片处，或更换刀片和防卷板玻璃面；
3、再次修片，修出平整截面再切片或重新包埋。
问题04：片子在防卷板上卷曲（进不了防卷板）
- 原因：
防卷板与刀片边沿距离不合适。
- 解决方案：
问题05：样品剐蹭到防卷板
- 原因：
- 解决方案：
问题06：片子有划痕
- 原因：
1、刀片有缺口；
2、防卷板有缺口。- 解决方案：
1、更换刀片或者侧向位移换新的刀口；
2、更换防卷板玻璃面或侧向位移换新的防卷板区域。
问题07：切片震颤或有杂音
- 原因：
1、组织与样本托之间未冷凝稳固；
2、刀片、刀架和样本头未锁紧；
3、组织过硬且包埋不规则。- 解决方案：
1、重新用包埋剂将组织与样品托包埋冷冻；
2、检查刀片、刀架和样本头是否锁紧；
3、增加切片厚度。
问题08：切片厚度不均
- 原因：
1、刀架角度不合适，刀片背面有碎屑或结冰，切片速度不一致；
2、刀片和样品头未锁紧；刀架未锁紧。- 解决方案：
1、通过调整刀架间隙角（出厂默认是5°）从而调整刀片角度，清理刀片锁紧位置和更换刀片，调整切片速度；
2、检查刀片、刀架和样本头是否锁紧。
问题09：组织粘在防卷板上
- 原因：
1、防卷板温度过高或位置不合适；
2、防卷板带静电；
3、脂肪等组织粘在防卷板边沿。- 解决方案：
1、切片前，防卷板先冷冻一下或调整防卷板位置；
2、更换防卷板玻璃另一侧试试效果；
3、清理防卷板边沿再切片。
问题10：防卷板抬起后，片子卷曲
- 原因：
1、防卷板温度过高；
2、包埋剂包埋不均匀。
- 解决方案：
1、切片前，防卷板先冷冻一下；
2、组织包埋的厚度和形状尽量规则，再用毛笔辅助展片。
问题11：载玻片无法贴片
- 原因：
- 解决方案：
1、载玻片温度升高后再贴片；
2、载玻片贴片前放置于箱体外部。相关推荐
评论列表共有 0 条评论
暂无评论
发表评论
取消回复
兴趣标签
热门下载
干货推荐
明星产品
关注我们
扫码关注我们
了解更多相关信息