冰冻切片机做冰冻切片有裂隙怎么办？

作者：RWD

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病理切片方案

我们都知道，含水分多的组织：如甲状腺、肝脏、脑、脾、肾组织，以及一些细胞较丰富的组织：如软组织肿瘤、淋巴结组织等在做冷冻切片的时候比较容易出现裂隙。组织结构完整性被破坏，增加阅片难度，一直以来是科室技术老师和阅片老师比较头疼的问题。

冰冻切片机做冰冻切片有裂隙怎么办？

造成冰冻切片出现裂隙的原因，主要有以下两点：

（1）冰晶。组织缓慢冷冻，细胞水分析出所致，或新鲜受检组织没有吸水处理或者避开水源而导致冰晶产生。

（2）组织块的硬度。温度过低或过冻的组织，还有含水分多的组织，容易造成冷冻组织切片时组织破碎的状况（硬度增加带来脆性增加）。

以上两点因素的矛盾限制给部分组织冷冻切片带来了更大的挑战。那有没有好的方式可以规避这两点因素造成的片子裂隙问题呢？接着往下翻。

查阅了相关资料以及和多位技术老师交流后，以下方法可有效缓解甚至解决冷冻切片机切片裂隙问题。

方法如下:

（1）取材：取材厚度建议3~5mm，尽量避开水源。

（2）冷冻组织：箱体温度设置在-23℃至25℃，先在样本托中心滴上OCT包埋剂，后放置组织块，将组织块深入包埋剂中，接着在速冻台上冷冻。

（3）固定式吸热块（冷锤）：观察到组织四周开始冷冻并逐渐向中间变白时，即可用冷锤压平组织，使组织表层瞬间冷却，既避免冰晶形成，又可加速冷冻，节约时间。

（4）切片：粗修后，可按照设定厚度进一步做精修。再用大拇指（戴手套）温暖组织切片3~4秒（这部操作主要是使组织表层温度回温，脆性下降），然后缓慢而匀速地切片。要注意的是温暖组织切面时间不宜过长，否则组织结构会受影响。

（5）固定：湿片固定易脱片，可采用FineFIX 液固定。贴片后迅速固定。

（6）其他操作同常规

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