冰冻切片机做冰冻切片有裂隙怎么办?

冰冻切片机做冰冻切片有裂隙怎么办?

作者:RWD
浏览量:4057
我们都知道,含水分多的组织:如甲状腺、肝脏、脑、脾、肾组织,以及一些细胞较丰富的组织:如软组织肿瘤、淋巴结组织等在做冷冻切片的时候比较容易出现裂隙。组织结构完整性被破坏,增加阅片难度,一直以来是科室技术老师和阅片老师比较头疼的问题。


冰冻切片机做冰冻切片有裂隙怎么办?


造成冰冻切片出现裂隙的原因,主要有以下两点:

(1)冰晶。组织缓慢冷冻,细胞水分析出所致,或新鲜受检组织没有吸水处理或者避开水源而导致冰晶产生。

(2)组织块的硬度。温度过低或过冻的组织,还有含水分多的组织,容易造成冷冻组织切片时组织破碎的状况(硬度增加带来脆性增加)。

以上两点因素的矛盾限制给部分组织冷冻切片带来了更大的挑战。那有没有好的方式可以规避这两点因素造成的片子裂隙问题呢?接着往下翻。

查阅了相关资料以及和多位技术老师交流后,以下方法可有效缓解甚至解决冷冻切片机切片裂隙问题。

方法如下:

(1)取材:取材厚度建议3~5mm,尽量避开水源。

(2)冷冻组织:箱体温度设置在-23℃至25℃,先在样本托中心滴上OCT包埋剂,后放置组织块,将组织块深入包埋剂中,接着在速冻台上冷冻。

(3)固定式吸热块(冷锤):观察到组织四周开始冷冻并逐渐向中间变白时,即可用冷锤压平组织,使组织表层瞬间冷却,既避免冰晶形成,又可加速冷冻,节约时间。

(4)切片:粗修后,可按照设定厚度进一步做精修。再用大拇指(戴手套)温暖组织切片3~4秒(这部操作主要是使组织表层温度回温,脆性下降),然后缓慢而匀速地切片。要注意的是温暖组织切面时间不宜过长,否则组织结构会受影响。

(5)固定:湿片固定易脱片,可采用FineFIX 液固定。贴片后迅速固定。

(6)其他操作同常规
收藏 点赞(1)
分享
评论列表共有 0 条评论
暂无评论
在生命科学、动物健康和临床医疗领域提供可信赖的解决方案和服务,全力帮助客户取得成功