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光遗传刺激的频率根据不同的实验需求而有所不同,具体情况可参考已发表的文献进行选择。刺激时不要超过通道蛋白的响应频率,不然容易出现脱敏效应。
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(1) 取材厚度建议3~5mm,尽量避开水源。(2)箱体温度设置在-23°C至25°C,先在样本托中心滴上OCT包埋剂,后将组织块深入包埋剂中,接着在速冻台上冷冻。(3)观察到组织四周开始冷冻并逐渐向中间变白时,即用冷锤压平组织,使组织表层瞬间冷却。
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首先用颅钻接触Bregma,将该点定为零点,随后移动至Lambda点,比较Bregma和Lambda两点高度差,若小于0.03mm则认为颅骨前后水平,若大于0.03mm则需要通过调整适配器高度调平;
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1、需要视频记录分析的水迷宫、T迷宫、Y迷宫、巴恩斯迷宫、新物体识别、社交等实验;2、通过厌恶刺激进行的条件恐惧、穿梭、避暗、跳台等恐惧相关实验;3、利用奖赏进行的5CSRT/PD/PAL/TUNL等操作性条件反射实验。
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Bregma点与Lambda点中间左右各2.3mm处颅骨的高度差小于0.03mm,以及Bregma和Lambda两个点高度差小于0.03mm,瑞沃德有一款旋转定位仪,通过旋转就可以调水平,很方便。
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缺血半暗带是不稳定的,是高度动态性的。所以激光多普勒探头的位置,要与梗死模型制作成功以后的时间高度相关。
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机械性疼痛是指组织在外力作用下发生的疼痛:当组织遭受外力刺激时,会发生变形;当变形程度超出机械性伤害感受器的阈值时,伤害感受器被激活,从而使机体产生疼痛的感觉。
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1.组织内含过多的坏死组织。组织细胞坏死崩解后,局部的渗透压升高,吸收水分,切片一经固定,水分逸出,坏死组织失去支撑作用,染色时组织容易脱落。