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肠道是重要的消化器官，也是最大的屏障器官，与肠道菌群共生并且维持免疫稳态。其中在肠道的固有层中包含着众多的免疫细胞，其中包括了 T 细胞、B 细胞、 DC 细胞、巨噬细胞、粒细胞等，其共同构建了肠道黏膜免疫的屏障。因此在进行肠道黏膜免疫研究实验时，需要分离高质量原代固有层免疫细胞。
科研学术圈一直流传着这样一种生物——它，可以污染细胞，污染后短期内不会影响贴壁生长的细胞贴壁；同时污染后的培养基也不会像细菌、真菌污染之后的培养基迅速变黄浑浊，有菌丝团漂浮在上清中。但是，没有人能确切地说出它到底是原虫还是其他病原微生物，也没有一个标准的图像记录，不管是相机实拍还是扫描电镜，甚至都没人能确定到底是“黑焦虫”还是“黑胶虫”。
台盼蓝染色作为活细胞计数的首选方式，但在实际使用过程中，台盼蓝染色计数会出现以下问题：台盼蓝染色的特异性不强，常会将原代细胞的碎片、PBMCs中残留的红细胞计入总数；台盼蓝细胞毒性较大，且染料配制浓度无统一标准，导致在进行多样品计数时由于间隔时间过久而结果误差较大。而AO/PI染色法可解决这些问题。
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