PCR扩增出的条带,亮度很弱的原因是什么?

PCR扩增出的条带,亮度很弱的原因是什么?

作者:RWD
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PCR扩增出的条带,亮度很弱的原因是什么?


PCR扩增出的条带,亮度很弱的原因是什么?


一般扩出来的条带在正确大小及长度下,亮度很弱的话,往往是扩增效率不高。


1、首先加入阳性对照,确保仪器和PCR试剂盒如酶是正常的。


2、考虑DNA模板的问题,先检查模板质量和浓度浓度过低条带暗,浓度过高PCR反应会受到抑制,扩增效率不高或DNA纯度不高都会影响扩增效率。


3、退火温度,可以设置一个退火温度梯度进行试验,确定最佳退火温度。


4、引物问题引物设计不太好,存在引物自身或引物间的互补配对情况。

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