流式细胞染色时间及温度如何选择?

流式细胞染色时间及温度如何选择?

作者:RWD
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流式细胞染色时间及温度如何选择?


流式染色取决于抗体和抗原之间的结合能力、染色时间和条件温度,一般首选根据所选抗体的说明书推荐的浓度和孵育时间、温度。


根据过往实践经验:受限于抗体浓度影响,当无说明书时,选择室温染色 12-15min (根据抗体浓度微调),或置于 4 度或冰上孵育 30min。染色时间主要控制点在于避免细胞破损死亡,因为细胞碎片会影响流式结果。另外,细胞消化完毕后应该尽快染色处理,特别像一些凋亡染色、胞内酶染色等需要保持细胞物质活性的实验。
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