快速上手高质量肿瘤样本单细胞悬液制备

快速上手高质量肿瘤样本单细胞悬液制备

作者:RWD
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癌症作为全球第二大死亡原因,在人群中的发病率与死亡率逐年上升。基于此,肿瘤研究是长期居高不下的热门研究方向。


当前肿瘤研究的热门领域为抗肿瘤药物开发、免疫治疗等。其常用的研究手段,是通过构建原位诱发、异位诱发动物模型分离获取肿瘤组织,或直接采用临床肿瘤组织样本。之后解离肿瘤组织获得细胞悬液,紧接下游可进行药物筛选等细胞培养实验,或者直接进行各项检测实验。所以制备高质量的肿瘤单细胞悬液,是开展后续一系列实验的关键步骤。


现有肿瘤组织解离的方法一般为手工操作的方式,仍存在许多问题:较其他组织研究,肿瘤研究的单次实验涉及样本量多,而手工操作则效率低。另外还容易产生操作误差,降低实验重复性。还有某些黏性较强的肿瘤样本在常规处理时还容易出现消化不彻底、碎片多的情况。


瑞沃德单细胞悬液制备仪可有效帮助实验人员提高实验效率,缩短实验时间。具有针对性肿瘤试剂盒和耗材配套标准优化程序,高效酶解、温和不刺激,最大限度保证细胞活性、降低损耗。0-4000rpm双向持续精确调控的机械切割也可帮助降低结团率。还可选配去碎片试剂盒降低样本碎片化程度。


瑞沃德肿瘤试剂盒


快速上手高质量肿瘤样本单细胞悬液制备


实操举例

人肿瘤组织单细胞悬液制备方法


1、试剂准备

使用试剂盒中配套的Buffer将酶A、B、C分别充分溶解。


2、样本准备

将人肿瘤组织或人源移植瘤组织放入普通含10%血清的培养基中(如果不立即处理,可贮存于组织保存中,4℃中,保存24h)。剔除坏死、腐烂、液化、钙化等部位,剔除明显的内生血管、血肿等。将肿瘤组织适当漂洗处理后,用锋利的剪刀剪成2~4mm大小的小块。


快速上手高质量肿瘤样本单细胞悬液制备


3、程序处理

转移到组织处理管中,并加入相应的酶溶液,根据肿瘤组织运行不同的程序H-Tumor-heater-1/2/3运行40min。


4、单细胞悬液收集

程序运行结束后,用润湿后的70 μm细胞滤器过滤细胞悬液样本,50 mL离心管收集细胞悬液,300×g离心7min,彻底弃掉上清后,用适当缓冲液重悬后用于单细胞测序、流式细胞术或原代细胞培养等。


实验结果

1、台盼蓝染色检测细胞活性


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2、细胞活率与得率

快速上手高质量肿瘤样本单细胞悬液制备

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