病毒注射实验如何安全操作?内含实验安全操作须知!

病毒注射实验如何安全操作?内含实验安全操作须知!

作者:RWD
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腺相关病毒(Adeno-associated viruses,常缩写为AAV),是一种隶属细小病毒科依赖性细小病毒属、能够感染人类以及其他部分灵长类动物的病毒。腺相关病毒直径约20纳米、无被膜,无法自主完成复制,全基因组长约4.8千碱基对(kb)[1][2]


腺相关病毒因毒性低、不能自主复制、不致病,且较少整合到宿主基因组中,因而被认为是一种较为理想的基因治疗载体,广泛应用于基因过表达、基因敲除、基因干扰表达和内源基因过表达。


腺相关病毒对人体的危害? 


腺相关病毒 (AAV) 与大多数病毒不同,它需要同时存在辅助病毒才能进行主动感染。高达 80% 的人群 AAV 抗体血清呈阳性。AAV 已知是一种非致病性病毒,目前尚不清楚 AAV 会引起任何人类疾病。但是最近的报告已确定 AAV 插入突变是发生肝细胞癌的潜在因素[3]。

除此之外,关于 AAV 感染与不良生殖结局(如胎盘并发症、自然流产和生育障碍)的发生之间的关系,以及 AAV 感染与 HPV 相关宫颈癌发生的保护作用之间的关系等等,目前对此研究结果不一致,因而关于 AAV 自然感染的许多问题尚没有定论[4]。


注射病毒如何正确防护? 


实验室管理要求:
实验室应当满足二级生物实验室要求,即P2实验室。相当于BSL-2实验室。主要用于初级卫生服务、诊断和研究。其实验对象的危害等级为二级:能够引起人类或者动物疾病,但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害,传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备有效治疗和预防措施的微生物(中等个体危害、有限群体危害)
实验人员防护要求:
1.病毒使用前,操作人员应当充分了解病毒相关实验安全问题,加强安全操作意识。在实验操作中,穿戴好实验服、口罩、护目镜以及一次性手套,尽量不要裸露双手以及手臂皮肤。
2.病毒操作时,注意避免蛋白酶或细菌污染,建议使用 DNase/RNase-Free 耗材进行操作。操作过程中如果有病毒溅出,立即使用70%酒精加1% SDS溶液擦拭消毒。
3.实验结束后,请用84溶液浸泡接触过病毒的枪头、离心管和玻璃电极,消杀病毒至少20 min。实验人员请及时用肥皂水清洁双手。所有生物废料的处理均需遵从公共机构发布的和所处机构制定的规范条例执行。

4.若眼睛、皮肤等不小心接触到病毒,请立即用大量清水冲洗。若病毒接触到伤口等部位,立即用10%碘伏溶液擦洗之后,用大量清水冲洗,建议冲洗时间至少20 min。


病毒注射所需的设备   


MP-500玻璃微电极拉制仪:
加热片固定卡槽—操作简便
内置拉制模版—智能高效
一体式插拔湿度控制室—人性化设计

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R-480注射泵:

高精度、密封性好、注射运行稳定

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动物麻醉系统:

一体化机身设计
麻醉过程稳定可控
双通道独立控制
低应激诱导,高效气体回收

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脑立体定位仪:

精准稳定、种类齐全、适配多种实验场景

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参考资料  

[1]Naso, Michael F.; Tomkowicz, Brian; Perry, William L.; Strohl, William R. Adeno-Associated Virus (AAV) as a Vector for Gene Therapy. BioDrugs. 2017, 31 (4): 317–334.
[2]Wu, Zhijian; Yang, Hongyan; Colosi, Peter. Effect of Genome Size on AAV Vector Packaging. Molecular Therapy. 2010, 18 (1): 80–86.
[3]Araujo, Natalia M. "A dual role for adeno-associated virus in human health." Virology Journal 20.1 (2023): 228.
[4]Sant’Anna, Thaís B., and Natalia M. Araujo. "Adeno-associated virus infection and its impact in human health: an overview." Virology Journal 19.1 (2022): 173.
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