实验干货!防止分选柱堵塞的前处理技巧
实验干货!防止分选柱堵塞的前处理技巧
首先,制备出高质量的单细胞悬液是开展下游分选实验的关键,活性高、分散好、无杂质碎片等等都是评价单细胞悬液是否质量高的标准。在消化裂解组织时,可以使用胶原酶、弹性蛋白酶、透明质酸酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、脱氧核糖核酸酶I 等联合消化,配合充分振荡、混悬细胞,能够使得细胞团块解聚。
然后可使用细胞筛网过滤团块,进一步去除碎片和杂质。接着要对细胞悬液进行计数,不要超过分选柱最大建议容量。
最后在加入细胞悬液前,先观察液体是否有气泡,如有气泡可以轻微摇晃去除气泡,加入细胞悬液时应当缓慢加入避免产生气泡。
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