如何快速找到PCR最适合的退火温度？
如何快速找到PCR最适合的退火温度？
PCR一般包括三个步骤: 变性，退火，延伸。
其中，退火过程中温度是非常是非常重要的一个参数，温度过高会导致产量降低、甚至得不到产物，温度过低又会导致非特异扩增。
梯度PCR是寻找最佳退火温度最简便的方式，一次实验可以同时设置12种不同的退火温度。利用梯度PCR仪，通过现有的引物熔解温度(Tm)设置温度区间。起始温度设置低于估算的Tm5°C，以2°C为增量，逐步提高退火温度。相关推荐
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