瑞沃德切片机在OXA诱导小鼠特异性皮炎模型中的应用
瑞沃德切片机在OXA诱导小鼠特异性皮炎模型中的应用
前言
特异性皮炎 （AD）是一种慢性、复发性、炎症性皮肤病，是皮肤对环境触发因素反应过度。皮损与一种或多种典型的特应性体征有关，例如手掌超线性和眶下皱襞。患者表现血清IgE、细胞因子和趋化因子水平升高，病理检查显示急性病变有海绵病、角化过度和角化不良，慢性病变有明显的表皮增生、棘皮病和血管周围淋巴细胞和肥大细胞积聚。AD的小鼠模型有20多种，可分为基因工程模型、近交系模型、外源性药物诱导模型（图1）等。其中，外源性药物诱导的模型包括半抗原诱导的小鼠模型、过敏原诱导的模型和MC903（钙泊三醇）诱导的模型。
半抗原诱导的AD小鼠模型：如恶唑酮（OXA）和三硝基氯苯（TNCB）常用于诱导过敏性接触性皮炎，主要引起Th1主导的反应。
本文介绍恶唑酮（OXA）致敏诱导小鼠特异性皮炎的方法，以及瑞沃德切片机在皮肤组织病理诊断中的应用。
材料
1、实验动物
BALB/c，6-8周龄，雌性
2、造模试剂
溶媒：丙酮：橄榄油（4：1）；1%OXA；0.1%OXA
3、造模方法
小鼠后耳部及背部毛发脱毛后直接涂抹1%OXA OXA于D-7致敏，间隔一周后每周使用0.1%OXA致敏三次，连续至D18。
模型评估
1、皮肤、耳朵厚度
皮肤厚度测量：致敏前使用游标卡尺对造模部位皮肤厚度进行测量记录，测量方式如图
2、皮损评分
致敏造模后观察小鼠造模部位皮损状况，根据下表进行评分。
3、血清炎症因子
采集小鼠血清，使用ELISA试剂盒检测血清中炎症因子水平：IgE、IL-4、IL-13、IL-31。4、皮肤组织病理诊断
实验终点将小鼠安乐死后取造模部位组织，进行病理诊断。
皮肤组织切片小技巧
1. 皮肤为扁平容易发生卷曲的组织可平摊在滤纸上放置于包埋盒中进行固定。
2. 皮肤组织包埋时注意调整包埋角度，皮肤垂直于包埋盒或样品托进行包埋。
3. 使用瑞沃德冷冻切片机切皮肤组织推荐温度：箱体温度-25℃，样本头温度-20℃。
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