心脏骤停复苏动物模型下脑神经功能，非折叠蛋白分支XBP1s的效应研究
心脏骤停和复苏动物模型的建立
1、用5%异氟烷诱导麻醉3-4个月龄小鼠，气管插管后，小鼠在进行CA前维持1.5%-1.7%的异氟烷吸入。
2、通过探头持续测量直肠温度，整个过程保持在36.5±0.5℃环境下。分别将电极针插入双侧前肢和左后肢，连续记录心电情况。
3、剃光颈部毛发，切开1cm皮肤切口，暴露出颈静脉。待生理状态稳定后，从颈静脉取血0.3 mL，随后从颈静脉注入0.5 mol/L KCl 30 μL诱发心脏停搏，以心电图波形监测CA的发生。
4、当CA发生后，停止肺通气。于CA后3分钟重新输注血液。CA后8分钟，将吸入的氧气调整至100%。CA 8.5分钟后，恢复机械通气，快速静推肾上腺素100 μL (32 μg/mL)，然后持续输注肾上腺素20 μL/min。
5、单指按压胸部，每次按压约300次/分钟，直到恢复自发血液循环，即出现稳定的心电图窦性节律，此时肾上腺素输注随即停止，肾上腺素最大输注量应限制在300 µl。
6、如果在3分钟内不能恢复自发性血液循环，则放弃复苏，并将该动物排除在研究之外。一旦小鼠获得自主呼吸，就可以将其被从手术台上取出，至于温暖环境下恢复。
A不同年龄小鼠大脑皮层血流随心脏骤停-恢复的变化情况彩图
B不同年龄小鼠大脑皮层血流量随心脏骤停-恢复的变化情况量化数据
Abbr.CA- cardiac arrest;ROSC -Return of spontaneous circulation;CBF-cerebral blood flow
RFLSI Ⅲ 激光散斑血流成像系统
激光散班血流成像，助力心脏骤停复苏模型的脑血流研究。
非折叠蛋白分支XBP1s的效应研究
心脏骤停和复苏导致脑缺血再灌注(I/R)损伤，与脑神经元的死亡密切相关。为此，研究者们1通过促进受损的细胞功能的恢复，试图维持细胞内稳态，以此来开拓一种内源性的治疗方法。
非折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)是一种提高细胞存活的通路，在内质网(ER)受损或内质网应激发生后，UPR将会被激活，其主要作用是恢复内质网稳态，促进细胞存活。
缺血性卒中或CA/复苏导致的脑I/R损伤会导致内质网应激并诱发UPR的激活。作为UPR的一个分支，转录因子XBP1的功能是上调葡萄糖代谢相关酶的表达，并且促进O-linked β-n-乙酰氨基葡萄糖（β-N-acetylglucosamine）的修饰，即O-GlcNAc糖基化。
具体实验方法就是通过基因导入和基因敲除技术获得Xbp1过表达和Xbp1缺失的两种小鼠。通过上述步骤建立小鼠心脏骤停和复苏动物模型，再进行行为学评估（Rotarod；Open field）和Neurologic score评分。
Latency：使用转棒仪，通过3次试验的平均数据计算从转棒上跌落的潜伏时间。每只小鼠在CA前连续3天接受旋转训练。
Distance：旷场实验，测算小鼠的活动距离
Neurologic score：用9分制评分表评估神经功能缺陷。(9分=正常，0分=严重伤害)
可以看出神经元特异性Xbp1敲除小鼠的CA行为学结果较差，而神经元特异性表达Xbp1的小鼠的CA行为学结果较好。实验结论：激活的XBP1可以对CA后的脑神经起到保护的作用。
