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单细胞测序技术的快速发展为研究脂肪组织的细胞异质性和功能多样性提供了新的机会。然而,在进行兔子脂肪组织单细胞测序之前,需要进行一系列的前处理步骤,以确保测序数据的准确性和可靠性。
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1.抗体与磁珠溶液都是均匀胶体,取液时无需摇晃,避免产生气泡,导致取液量产生误差;2.细胞悬液加入磁珠或抗体后用移液枪轻柔混匀,避免产生气泡,导致结合效率降低;当细胞量较多时,在孵育过程中途可轻轻摇晃样液,避免细胞沉降影响结合效率;3.孵育过程最好在2~8°C冰箱中进行,若不低温孵育,可能会导致细胞活性低:4.过柱子时预先把样品液放置室温,否则温差可能导致分选柱内产生过多气泡,纯度不理想
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腺相关病毒因毒性低、不能自主复制、不致病,且较少整合到宿主基因组中,因而被认为是一种较为理想的基因治疗载体,广泛应用于基因过表达、基因敲除、基因干扰表达和内源基因过表达。
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细胞分选实验中,分选柱堵塞,导致分选实验前功尽弃,经常令不少同学头疼不已。如何防止柱子堵塞?跟随小沃来探索一下吧!
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PCR一般包括三个步骤: 变性,退火,延伸。其中,退火过程中温度是非常是非常重要的一个参数,温度过高会导致产量降低、甚至得不到产物,温度过低又会导致非特异扩增。梯度PCR是寻找最佳退火温度最简便的方式,一次实验可以同时设置12种不同的退火温度。利用梯度PCR仪,通过现有的引物熔解温度(Tm)设置温度区间。起始温度设置低于估算的Tm5°C,以2°C为增量,逐步提高退火温度。
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肠道是重要的消化器官,也是最大的屏障器官,与肠道菌群共生并且维持免疫稳态。其中在肠道的固有层中包含着众多的免疫细胞,其中包括了 T 细胞、B 细胞、 DC 细胞、巨噬细胞、粒细胞等,其共同构建了肠道黏膜免疫的屏障。因此在进行肠道黏膜免疫研究实验时,需要分离高质量原代固有层免疫细胞。
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近期有不少同学问到胰腺组织切片问题,切出来的片子要么组织没有切下来,要么切的片子碎裂或者空洞。我们都知道胰腺组织主要组成部分是胰腺小叶、结缔组织和脂肪,结构松散,同时胰液含量高,增加了石蜡制片的难度。
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该任务可用于实验小鼠认知水平的评估,实验人员训练小鼠对两种实验气味(A&B)做出区分,有两种经典执行范式
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瑞沃德单细胞悬液制备仪可有效帮助实验人员提高实验效率,缩短实验时间。具有针对性肿瘤试剂盒和耗材配套标准优化程序,高效酶解、温和不刺激,最大限度保证细胞活性、降低损耗。
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a) 可将蜡块放入4度冰箱中冰冻过夜,精切前使用加湿的冰块冰冻,降低室温,增加湿度。一般不建议放在-20℃环境下冷冻。b) 更换刀口或试用其他品牌切片刀,清理刀架。c) 组织浸蜡不够,可将蜡块连同模具放入包埋机中,浸润一定时间,重新包埋。d) 延长冷冻时间,哈气,切片后在冷水中尽量漂开后再换热水展片。e) 适当调大切片角度